如何確定熒光染料的激發(fā)波長(zhǎng)/發(fā)射波長(zhǎng)?
如何確定熒光染料的激發(fā)波長(zhǎng)/發(fā)射波長(zhǎng)?
熒光光譜分為:激發(fā)光譜(PLE)和發(fā)射光譜(PL)。
激發(fā)光譜:固定發(fā)射光的波長(zhǎng),改變激發(fā)光的波長(zhǎng),記錄熒光強(qiáng)度隨激發(fā)波長(zhǎng)的變化。發(fā)射光譜:固定激發(fā)光的波長(zhǎng),記錄不同發(fā)射波長(zhǎng)處熒光強(qiáng)度隨發(fā)射波長(zhǎng)的變化。
無論是激發(fā)還是發(fā)射熒光光譜圖,其都是記錄發(fā)射熒光強(qiáng)度隨波長(zhǎng)的變化。所以熒光光譜中縱坐標(biāo)為強(qiáng)度,橫坐標(biāo)為波長(zhǎng)。首先從圖中能獲取峰位和半峰寬。峰位的直觀體現(xiàn)是熒光的顏色;半峰寬則表示熒光的純度。
因此可以根據(jù)這種熒光素的激發(fā)譜線來確定其激發(fā)波長(zhǎng),根據(jù)其發(fā)射譜來確定其發(fā)射波長(zhǎng)。
激發(fā)譜:不同波長(zhǎng)的光激發(fā)熒光素后,熒光強(qiáng)度的變化。
發(fā)射譜:同一波長(zhǎng)的光激發(fā)熒光素后,各波長(zhǎng)下的熒光強(qiáng)度的變化。
一般都取峰值。
其發(fā)射波長(zhǎng)會(huì)隨激發(fā)波長(zhǎng)變嗎?
對(duì)不同材料來說不同,絕大多數(shù)情況下,發(fā)射波長(zhǎng)會(huì)隨著激發(fā)波長(zhǎng)的偏移而有所偏移。 對(duì)于固態(tài)物質(zhì),主要是因?yàn)榉肿优c其它材料形成了π建,對(duì)于量子點(diǎn)溶液,激發(fā)波長(zhǎng)也會(huì)顯著導(dǎo)致發(fā)射光譜的不同。 但是不是絕對(duì)的,比如對(duì)于Alex555分子,發(fā)射波長(zhǎng)的偏移往往就相對(duì)較小,這是由于分子內(nèi)部的能帶結(jié)構(gòu)所決定的。
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部分產(chǎn)品:
Cy3 146368-13-0
Cy3-NHS; Cy3 NHS Ester 146368-16-3
Cy3-alkyne 1010386-62-5
Cy5 146368-11-8
Cy5-NHS;Cy5 NHS Ester 146368-14-1
Cy5-alkyne 1345823-20-2
Cy7 943298-08-6
Cy7-NHS; Cy7 NHS Ester 477908-53-5
Cy7-alkyne
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