三碘甲狀腺原氨酸-雞卵清白蛋白偶聯(lián)物的制備方法有哪些?
三碘甲狀腺原氨酸-雞卵清白蛋白偶聯(lián)物|3,3’,5-Triiodothyronine-Ovalbumin Conjugate(T3-OVA Conjugate)
三碘甲狀腺原氨酸 - 雞卵清白蛋白偶聯(lián)物的制備方法通常是先通過(guò)化學(xué)合成的方法得到三碘甲狀腺原氨酸,然后將其與雞卵清白蛋白進(jìn)行偶聯(lián)35。具體的制備步驟如下:
1.合成三碘甲狀腺原氨酸:通過(guò)化學(xué)反應(yīng)將碘和酪氨酸結(jié)合,形成三碘甲狀腺原氨酸。
2.活化三碘甲狀腺原氨酸:使用適當(dāng)?shù)幕罨瘎?,如碳二亞胺?/span>EDC)或 N - 羥基琥珀酰亞胺(NHS),將三碘甲狀腺原氨酸的羧基或氨基活化,使其能夠與雞卵清白蛋白上的氨基或羧基發(fā)生反應(yīng)。
3.偶聯(lián)反應(yīng):將活化后的三碘甲狀腺原氨酸與雞卵清白蛋白在適當(dāng)?shù)木彌_液中進(jìn)行反應(yīng),通常在室溫下攪拌數(shù)小時(shí),使兩者發(fā)生共價(jià)結(jié)合,形成三碘甲狀腺原氨酸 - 雞卵清白蛋白偶聯(lián)物。
4.純化和鑒定:使用凝膠過(guò)濾、離子交換層析或親和層析等方法對(duì)反應(yīng)產(chǎn)物進(jìn)行純化,以去除未反應(yīng)的物質(zhì)和雜質(zhì)。然后通過(guò)紫外可見(jiàn)光譜、SDS-PAGE 或 Western blot 等方法對(duì)純化后的偶聯(lián)物進(jìn)行鑒定,確保其質(zhì)量和純度。
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