FITC-海藻糖|FITC-Trehalose

FITC - 海藻糖的熒光標(biāo)記原理主要基于熒光素異硫氰酸酯（FITC）與海藻糖的化學(xué)反應(yīng)以及 FITC 的熒光特性，具體如下：

1.FITC 的結(jié)構(gòu)與特性：

FITC 是一種有機(jī)熒光染料，其分子結(jié)構(gòu)中含有異硫氰酸基團(tuán)（-N=C=S），這個(gè)基團(tuán)具有較高的化學(xué)反應(yīng)活性。

在特定的條件下，FITC 能夠與含有氨基（-NH?）等活性基團(tuán)的分子發(fā)生共價(jià)結(jié)合。并且 FITC 在受到特定波長(zhǎng)的光激發(fā)后，能夠吸收能量并發(fā)射出特定波長(zhǎng)的熒光，這是其能夠作為熒光標(biāo)記物的重要基礎(chǔ)。

2.海藻糖的結(jié)構(gòu)與可修飾位點(diǎn)：

海藻糖是一種由兩個(gè)葡萄糖分子以 1,1 - 糖苷鍵構(gòu)成的非還原性糖。其分子結(jié)構(gòu)相對(duì)穩(wěn)定，但可以通過(guò)化學(xué)方法對(duì)其進(jìn)行修飾。

通常需要先對(duì)海藻糖進(jìn)行化學(xué)處理，在其分子上引入羧基（-COOH）等活性基團(tuán)，使其能夠與 FITC 發(fā)生反應(yīng)。比如可以使用丁二酸酐等試劑與海藻糖反應(yīng)，將海藻糖上的羥基（-OH）轉(zhuǎn)化為羧基。

3.標(biāo)記反應(yīng)過(guò)程：

當(dāng)經(jīng)過(guò)處理后的帶有羧基的海藻糖與 FITC 混合時(shí)，FITC 的異硫氰酸基團(tuán)會(huì)與海藻糖分子上的羧基發(fā)生親核加成反應(yīng)，形成穩(wěn)定的共價(jià)鍵，從而將 FITC 連接到海藻糖分子上。

經(jīng)過(guò)反應(yīng)后，得到的 FITC - 海藻糖復(fù)合物既保留了海藻糖的基本結(jié)構(gòu)和性質(zhì)，又具有了 FITC 的熒光特性。當(dāng)用特定波長(zhǎng)（如 493nm 左右）的光照射 FITC - 海藻糖時(shí)，它會(huì)吸收光子能量，電子從基態(tài)躍遷到激發(fā)態(tài)，隨后電子從激發(fā)態(tài)回到基態(tài)時(shí)會(huì)釋放出能量，發(fā)出波長(zhǎng)約為 520nm 的綠色熒光。

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