如何制備 CY5-谷氨酸?
2024-10-29
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CY5-谷氨酸|CY5-L-Glutamic acid
以下是一種可能的制備 CY5 - 谷氨酸的方法:
一、材料準(zhǔn)備
1.谷氨酸。
2.CY5 熒光染料(通常帶有活性基團(tuán),如 N - 羥基琥珀酰亞胺酯(NHS)活化的 CY5)。
3.適當(dāng)?shù)木彌_溶液,如磷酸鹽緩沖液(PBS)等。
4.反應(yīng)容器、攪拌裝置、離心機(jī)、透析袋等實(shí)驗(yàn)設(shè)備。
二、步驟
1.活化 CY5 熒光染料:
將 NHS 活化的 CY5 溶解在適當(dāng)?shù)木彌_溶液中,確保染料充分溶解并處于活化狀態(tài)。
2.谷氨酸與 CY5 反應(yīng):
將谷氨酸加入到含有活化 CY5 的溶液中。
在適當(dāng)?shù)臏囟龋ㄈ缡覝鼗蛏愿邷囟龋┫聰嚢璺磻?yīng)一定時(shí)間,使谷氨酸與 CY5 發(fā)生反應(yīng),形成 CY5 - 谷氨酸復(fù)合物。
3.純化:
反應(yīng)結(jié)束后,可以通過(guò)離心等方法去除未反應(yīng)的物質(zhì)和雜質(zhì)。
然后使用透析袋對(duì)產(chǎn)物進(jìn)行透析,以去除未結(jié)合的染料和小分子雜質(zhì),進(jìn)一步純化 CY5 - 谷氨酸復(fù)合物。
4.鑒定與分析:
可以使用紫外 - 可見(jiàn)光譜、熒光光譜等方法對(duì)制備的 CY5 - 谷氨酸進(jìn)行鑒定,確認(rèn)熒光染料成功標(biāo)記到谷氨酸上。
還可以通過(guò)高效液相色譜(HPLC)等方法分析產(chǎn)物的純度和濃度。